1、水样过滤
采用美国EPA推荐的PALL公司Envirochek-HV囊式滤器对水过滤，将卵囊、孢囊及其他无知收集在过滤器上。该过滤器可用于实验室批量水样的过滤，也可以用于野外现场水样的过滤。过滤后的囊式滤器，用洗脱剂将拦截在滤囊上的颗粒物震荡洗脱下来，并将洗脱物收集在一个250毫升的离心管中。



Life Sciences
◇两虫检测囊式过滤器:水样过滤采用图2所示的方法将PALL公司囊式滤器（见图3）安装好，过滤器的滤囊用图4所示的震荡器进行洗脱分离。 
◇特点 
§ EPA1622＆1623方法推荐首选产品。 
§ 1um孔径的改良滤膜能100%截留两虫。 
§ 一次性使用的设计避免了因其他因素的污染而造成的实验结果误差。 
§ 专用于源水与自来水的隐孢子虫与贾第鞭毛虫的浓缩与回收，使用简单、方便、快捷。 
2、免疫磁分离 

    离心管中的洗脱物通过离心分离作用，使颗粒物沉淀在离心管底部，同时去掉离心管中的上清液。将离心后的含有卵囊和孢囊的沉淀物用纯水混匀，并向其中加入Dynal公司的免疫磁分离试剂（Dynabeads GC-Combo试剂盒）进行磁分离。具体做法是：首先用带有抗体（抗隐孢子虫和贾第鞭毛虫）的特殊磁珠捕获沉淀物的卵囊和孢囊；其次通过Dynal公司的MPC-S磁粒浓缩器将捕获有卵囊和孢囊的磁珠吸附在试管壁上，去掉未被吸附在试管壁上含杂质的液体，以达到卵囊和孢囊从沉淀物中分离出来的目的；再次加入盐酸将管壁上捕获有卵囊和孢囊的磁珠进行洗涤，以使卵囊和孢囊从磁珠上解离出来；最后将含有卵囊和孢囊的纯化液转移至井形载玻片上进行制片。 
◇隐孢子虫和贾第鞭毛虫的纯化—免疫磁分离技术:1999年美国环保局在EPA1623方法中规定利用IMS{Immuo Magnetic Separation}免疫磁分离技术Dynabeads来分选检测饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第鞭毛虫孢囊，其原理是：利用带有特异性抗体的磁珠与样品中的目标产物G/C特异性抗原相结合，在磁场中搞笑选择中分离。 

3、IFA染色&镜检 

    待井形载玻片的纯化液干后，用NaOH中和井形载玻片上样品，再用Dynal公司的Aqua-GloTMG/C染色试剂盒，将卵囊和孢囊在井形载玻片上用磁荧光标记的单性抗体和DAPI溶液着色后，盖上盖玻片。然后，OLYMPUS荧光和差分干涉相衬（DIC）显微镜对着色样本进行检测。观察样本，对符合卵囊和孢囊大小、外形、荧光特性的对象进行定性、定量分析。 

◇研究型正置荧光生物显微镜系统:本实验中所配置的OLYMPUS正置阳光生物显微镜可以很好地完成明场和暗场显微镜观察，具有良好的可靠性、稳定性和实验室广泛应用等特性。显微镜数码照相部分所配置的数码照相机，为专业应用的高清晰度数码相机，采用不同于民用的数码数据采集及系统，此款相机的成像最高可达到1200万像素级别，并且在使用明场拍摄的同时可以可靠、稳定地完成荧光图像、暗场等特殊拍摄的要求，对实验图像数据的记录、再现和分析提供了很好的可能和保障；该相机的相关系统是目前应用比较普通、性能比较优越的；如出现问题也方便维修和更换配件。配备微机及色彩打印系统效果最佳。

· “EPA1623方法”所需部分产品信息

    

        

            

            
产品编号 
            
            

            
产品名称 
            
            

            
数量/包装 
            
        
        

            

            
颇尔（PALL）公司 
            
        
        

            

            
12107 
            
            

            
Envirchek囊式滤器，独立包装 
            
            

            
25个/箱 
            
        
        

            

            
4822
            
            

            
洗脱摇床，220V
            
            

            
1台 
            
        
        

            

            
4820
            
            

            
Laureth-12Paste，洗脱剂 
            
            

            
50克/瓶 
            
        
        

            

            
15222CP
            
            

            
蠕动泵，220V
            
            

            
1台 
            
        
        

            

            
13158 
            
            

            
真空/正压泵，220V
            
            

            
1台 
            
        
        

            

            
Dynal公司 
            
        
        

            

            
730.12 
            
            

            
隐孢子虫/贾第鞭毛虫磁性分选试剂盒 
            
            

            
50tests
            
        
        

            

            
740.03
            
            

            
Dynal10 
            
            

            
5支/包
            
        
        

            

            
120.01 
            
            

            
DynalM
            
            

            
个 
            
        
        

            

            
120.20
            
            

            
DynalM 
            
            

            
个
            
        
        

            

            
159.07 
            
            

            
DynalMx1混合液 
            
            

            
个 
            
        
        

            

            
740.04
            
            

            
Dynal载玻片
            
            

            
盒
            
        
        

            

            
BTF 
            
            

            
隐孢子虫孢囊悬浮液 
            
            

            
1×108
            
        
        

            

            
A100FLK
            
            

            
Aqua-GloG/C染色试剂盒
            
            
TUNEology 波长可调检测卡盒-->