AP碱性磷酸酶染色试剂盒
产品名称: AP碱性磷酸酶染色试剂盒
英文名称: Alkaline Phosphatase Stain Kit
产品编号: 40749ES50
产品价格: 0
产品产地: 翌圣生物
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T11:21:51
使用范围: null
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产品信息
产品描述
碱性磷酸酶,即Alkaline Phosphatase,缩写AP,该酶在大多数细胞类型中均有表达,但是在胚胎干细胞(ES)和诱导多能干细胞(iPS)内的表达水平明显升高;经固定的ES和iPS被碱性磷酸酶试剂盒染色后,未分化的细胞可呈现蓝/紫色,分化的细胞呈现无色。翊圣生物提供的该试剂盒特异性强、灵敏度高,可对ES和iPS细胞分化状况进行较好的评估。
以24孔板为例,40749ES50可以检测50 次,40749ES60可以检测100 次。
产品组分
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期6个月。不可冻存!
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)使用前请自备:PBS缓冲液、PBST或TBST、4%多聚甲醛。
3)本试剂盒染色液A、B瓶口若出现少量液体凝固属正常现象,融化混匀后正常使用即可。
使用方法
1、AP染色工作液的配制(配制完成后在30 min内使用)
根据待染色细胞量按照染色液A:染液B:染液C=50μl: 12.5 μl: 437.5 μl的比例配制适量AP染色工作液。
2、染色步骤
1)细胞准备:吸除细胞培养液,PBS润洗2~3次;
2)固定:加入 4% 多聚甲醛固定1~2 min,(以24孔板为例,每孔加入0.5 ml)。
【注】:固定时间不要超过该范围,过度固定会使AP失活。
3)润洗:吸除固定液,TBST润洗3次,切忌细胞干燥;
4) 染色: 吸除TBST溶液,加入足量新鲜配制的AP染色工作液(以24孔板为例,每孔加入0.5 ml),室温避光放置15~20min;
【注】:该过程中监视染色程度的变化,当颜色较深时即可吸除染色液终止染色,以免造成非特异染色。
5)镜检:吸除染色液,PBS润洗1次,最后保存于PBS溶液中,显微镜下观察染色结果。
【结果判定标准】:未分化细胞染色为蓝/紫色,分化的细胞染色为无色。
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