蛋白双向(2-D)电泳实验服务

实验技术简介:

双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS -PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离)，然后再进行SDS-PAGE (按照分子大小)， 经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

实验原理:

双向电泳是目前为止zui有效、使用最多的蛋白分离方法。差异蛋白质组学是在双向电泳后用考麻斯亮蓝、银离子或荧光染料等将蛋白斑点染色,然后比较差异。本公司在各类微生物、培养细胞、动植物组织(如动物软硬组织、体液、植物种子、叶子等)、亚细胞组分的双向电泳分离及后续质谱鉴定中均有丰富的经验。

蛋白质组学双向电泳技术服务项目:

1.根据客户需求定制蛋白质组学实验方案

2.各种规格胶条长度的双向电泳

3.考麻斯亮蓝染色、银离子染色; .

4.DIGE系统双向电泳。

5.图像分析

6.切胶质谱分析

服务说明:

1.我们的实验只对我们制作的样本负责,如您提供的是直接做等点聚焦的样本，我们不敢保证蛋白的有效分离。

2.蛋白质组学实验的总体实验流程;

实验流程:

1、样本制备

2、固相预制胶条水化

3、第--向等电聚焦(IEF)

4、胶条平衡→第二向SDS-PAGE电泳

5、凝胶染色检测

6、图片扫描

双向电泳服务结果提交:

1、实验的试剂耗材、仪器设备、操作过程--份;

2、实验结果凝胶扫描图片;

3、电泳凝胶(可收费干胶) ;

4、剩余样本。

说明:

1.样品制备指可用通常程序处理的原样，如样品较特殊(需要去除核酸、盐等杂质或需要浓缩)，价格将视进一步处理的难度和耗材用量另行商定;

2.建议客户提供的原样(组织、细胞、菌体等)湿重不少于100mg如直接提供蛋白提取物，则浓度不少于4ug/ul,总量不少于5mg;

3.样品的还原和烷基化过程一般在制备时进行;

4.图象处理与切胶主要是手I操作成本。

客户方需提供:

细胞，组织或蛋白。

实验周期:

5-10天

可提供技术支持: .

1、从现有的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等方法，获得带有目的基因的DNA片段。

2、在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到具有选择标记的载体分子上,形成能够自主复制的重组DNA分子。

3、将重组DNA分子转移到适宜的受体细胞，并使其一起增殖。

4、从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆。

5、由筛选出来的受体细胞克隆，提取出已经得到扩增的目的基因，供进一步分析研究使用。

6、将分离到的目的基因克隆到表达载体上，导入受体细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。

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