从原代组织中分离细胞，将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。然而，为了更好地测定细胞免疫功能，我们需要从动物外周血或组织中获取有活性的细胞，如淋巴细胞、单核细胞、粒细胞等。分离这类免疫细胞的方法有：密度梯度离心法、黏附分离法、流式细胞仪分离法等其他分离法。目前常用的是密度梯度离心法。索莱宝细胞分离液产品的研发原理就是基于不同细胞的密度差异，通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布。

   具体怎么实现呢？ 

以分离人外周血淋巴细胞为例：

1. 取新鲜抗凝全血（EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝均可）或者去纤维蛋白血液，用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。

2. 在离心管中加入适量分离液，将稀释后的血液平铺到分离液液面上方，注意保持两液面界面清晰。

3. 室温，水平转子500~1000g，离心20~30min。

4. 离心后将出现明显的分层：上层是稀释的血浆层，中间是透明的分离液层，血浆与分离液之间的白膜层即为淋巴细胞层，离心管底部是红细胞与粒细胞。

5. 小心地吸取白膜层细胞到15mL洁净的离心管中，10mL PBS或细胞洗涤液洗涤白膜层细胞。250g，离心10min。

6. 弃上清，5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞，250g，离心10min。

7. 重复步骤6。

8. 弃上清，细胞重悬备用

2. 无菌操作：在样品收集和分离过程中，应注意无菌操作，避免微生物污染。

3. 保证新鲜：血液样本为新鲜抗凝血（采血2 h以内），避免冷冻和冷藏，优抗凝剂选择为EDTA、枸橼酸和肝素。

4. 分离液的保存：分离液使用时应始终保持室温（18℃~25℃），如室内温度较低，可将分离液预热。

5. 细胞稀释及细胞洗涤液：稀释或洗涤细胞不可使用含钙离子、镁离子的缓冲液及培养液，其成分会导致血细胞凝集，大大降低细胞得率及纯度。

6. 注意添加顺序：样品在上，分离液在下，保持两液面界面清晰。

7. 离心管：选用玻璃材质离心管。部分塑料制品（如聚苯乙烯）因其带有的静电作用，可能会导致细胞挂壁，影响分离效果。

8. 离心：血液样本的粘稠度或者是温度差异，可能会影响分离效果，可以调节离心转数和离心时间，摸索分离条件。

1.要有针对性地选择产品。不同细胞的密度与体积是不同的，不同种属动物细胞的密度也是不同的。索莱宝针对不同客户科研需求，研发了不同种细胞的分离液，如：淋巴细胞分离液、粒细胞分离液、白细胞分离液和单个核细胞分离液；针对不同种属动物，研发了不同动物的细胞分离液，如：人、小鼠、大鼠、鸡、兔、牛、狗等等。同时，索莱宝细胞分离液系列产品满足了外周血、组织脏器、骨髓等不同样品的分离。索莱宝丰富多样的产品满足了客户的多种科研需求。

1. 要选择分层效果明显的产品。索莱宝细胞分离液产品，性价比高，分层效果明显。以人外周血淋巴细胞分离液为例，索莱宝分离液产品分离的白膜层非常清晰，而且白膜层没有弥散，效果优于其他品牌同类产品。